The conventional diagnosis challenge: Real-time PCR and nested PCR correlation with the scoring system for individuals at high-risk of Pneumocystis jirovecii pneumonia

Introduction. Pneumocystis jirovecii is an opportunistic fungus that affects mainly people living with HIV (CD4 cell count lower than 200 cells/ml) and other immunosuppressed patients. Since P. jirovecii does not grow on routine mycological media, diagnosis of P. jirovecii pneumonia relies on indirect evidence of its presence in respiratory samples. Objectives. To associate the results of direct immunofluorescence and two molecular methods with a score to predict P. jirovecii pneumonia in patients with AIDS. Materials and methods. A prospective study was conducted with 40 patients. A respiratory sample collected before treatment was subjected to direct immunofluorescence using the Merifluor kit, to nested PCR targeting the mitochondrial large subunit ribosomal RNA, and to the VIASURE real-time PCR kit. Results. These three techniques revealed P. jirovecii in 6, 12, and 15 samples, respectively. All positive samples by direct immunofluorescence were positive by nested PCR, and all positive samples by nested PCR amplified by real-time PCR. There was a statistically significant association between the P. jirovecii pneumonia score and the molecular methods. Two patients were early diagnosed and responded well to treatment. Conclusion. Molecular methods, especially real-time PCR, are recommended for early diagnosis of P. jirovecii pneumonia in AIDS patients.

Introducción. Pneumocystis jirovecii es un hongo oportunista que afecta principalmente a personas con HIV (recuento de CD4 menor de 200 células/ml) y a otros pacientes inmunosuprimidos. Como P. jirovecii no crece en los medios micológicos de rutina, el diagnóstico de neumonía por P. jirovecii se basa en la evidencia presente en muestras respiratorias. Objetivos. Asociar los resultados de la inmunofluorescencia directa y los de dos métodos moleculares con un puntaje para predecir la neumonía causada por P. jirovecii en pacientes con sida. Materiales y métodos. Se realizó un estudio prospectivo de 40 pacientes. Se recolectó una muestra respiratoria antes del inicio de tratamiento y se sometió a una prueba de inmunofluorescencia directa con el kit Merifluor, una PCR anidada para la amplificación de la subunidad larga del ribosoma mitocondrial y una PCR en tiempo real usando el kit VIASURE. Resultados. Estas tres técnicas evidenciaron la presencia de P. jirovecii en 6, 12 y 15 muestras, respectivamente. Todas las muestras positivas por inmunofluorescencia directa fueron positivas en la PCR anidada y todas las muestras positivas en la PCR anidada amplificaron por PCR en tiempo real. Se encontró una asociación estadística entre los valores de la neumonía causada por P. jirovecii y los métodos moleculares. Dos pacientes con diagnóstico temprano respondieron satisfactoriamente al tratamiento. Conclusión. Se recomiendan los métodos moleculares, especialmente la PCR en tiempo real, para el diagnóstico temprano de neumonía causada por P. jirovecii en pacientes con sida.

Compromiso renal atípico en amiloidosis de cadena ligera

Introducción la amiloidosis de cadena ligera (AL) es una entidad desencadenada por la proliferación de un clon de células plasmáticas que genera la acumulación de cadenas ligeras, las cuales se depositan en forma de fibrillas amiloides generando una disfunción orgánica. El compromiso renal generalmente se manifiesta como síndrome nefrótico, con un deterioro lento y progresivo de la función renal que puede llevar a un requerimiento de terapia dialítica. Objetivo demostrar el compromiso renal agresivo y subagudo de la amiloidosis sistémica. Presentación del caso paciente masculino de 35 años que consulta por malestar general, visión borrosa, mareos y oliguria con elevación de azoados, y que progresó rápidamente hasta el requerimiento de hemodiálisis en aproximadamente tres meses. Asociado se documenta polineuropatía periférica, infiltración cardiaca y ligera elevación de transaminasas. Ante negatividad de estudios de extensión, se logra documentar la presencia histopatológica de depósitos amiloides con inmunofluorescencia positiva para AL. Actualmente, se encuentra recibiendo esquema de quimioterapia con adecuada estabilidad clínica y tolerancia. Discusión y conclusión la amiloidosis AL es una entidad infrecuente, con compromiso multiorgánico importante y altas tasas de morbilidad y mortalidad. Se recalca en este caso el compromiso subagudo con requerimiento temprano de terapia dialítica y además se enfatiza la importancia de una sospecha y un diagnóstico oportuno en pacientes con compromiso renal y otras manifestaciones sistémicas.

Introduction Light chain amyloidosis is an entity triggered by the proliferation of a clone of plasma cells that generates the accumulation of light chains, which are deposited in the form of amyloid fibrils generating organic dysfunction. Renal compromise generally manifests as nephrotic syndrome, with a slow and progressive decline of renal function that can lead to dialysis therapy. Purpose The objective of this case report is to demonstrate the aggressive and subacute renal involvement of systemic amyloidosis. Case presentation We present a case of a 35-year-old male patient who consulted for general malaise, blurred vision, dizziness and oliguria with elevated nitrogen levels that progressed fastly to the requirement of hemodialysis in approximately 3 months. It was also reveal peripheral polyneuropathy, cardiac infiltration, and slight elevation of transaminases. Given the negativity of extension studies, amyloid deposits were documented histopathologically with positive immunofluorescence for LA. He is currently receiving chemotherapy regimen with adequate clinical stability and tolerance. Conclusion and discussion To conclude, AL amyloidosis is a rare entity, with significant multi-organ involvement and high rates of morbidity and mortality. In this case, the subacute involvement with an early requirement for dialysis therapy is emphasized, and the importance of suspicion and timely diagnosis in patients with kidney involvement and other systemic manifestations is emphasized.

Evaluación y caracterización de la sirtuina 2.3 de Giardia duodenalis (CdSir2.3)

La giardiasis es la enfermedad gastrointestinal de mayor incidencia mundial, causada por el protozoario Giardia duodenalis, para la cual no se cuenta con una vacuna o tratamiento eficiente. En aras de buscar nuevos blancos farmacológicos contra este parásito, se han estudiado las enzimas del metabolismo energético, como las sirtuinas, deacetilasas dependientes del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NAD). Previamente se identificó a GdSir2.1 y GdSir2.2 como deacetilasas dependientes de NAD, con localizaciones subcelulares diferentes. En este trabajo se estudió otro candidato a sirtuina (GdSir2.3) mediante herramientas bioinformáticas para la identificación de características típicas de la familia sirtuina en la secuencia del candidato, y experimentales como la obtención de la proteína recombinante 6xHis-GdSir2.3 que demostró actividad deacetilasa dependiente de NAD y que sirvió como antígeno en la producción de los IgY - α -6xHis-GdSir2.3 para la localización subcelular de la proteína endógena en G. duodenalis. Lo anterior concuerda con otros estudios donde se señala a GdSir2.3 como un importante regulador de la enquistación, debido a su aumento de expresión durante esta etapa del ciclo de vida, constituyéndola como un blanco farmacológico promisorio para el control de esta parasitemia.

Giardiasis is the gastrointestinal disease with the highest incidence worldwide, caused by the protozoan Giardia duodenalis, for which there is no vaccine or efficient treatment. In order to find new pharmacological targets against this parasite, energy metabolism enzymes such as sirtuins, deacetylases dependent on the nicotinamide adenine dinucleotide (NAD), have been studied. GdSir2.1 and GdSir2.2 were previously identified as NAD-dependent deacetylases, with different subcellular locations. In this work, another candidate for sirtuin (GdSir2.3) was studied using bioinformatic tools for the identification of typical characteristics of the sirtuin family in the sequence of the candidate; and experimental ones such as obtaining the recombinant protein 6xHis-GdSir2.3 that demonstrated NAD-dependent deacetylase activity; and that it served as an antigen in the production of IgY - α - 6xHis-GdSir2.3 for the subcellular localization of the endogenous protein in G. duodenalis. The foregoing is consistent with other studies where GdSir2.3 is indicated as an important regulator of encyst due to its increased expression during this stage of the life cycle, constituting it as a promising drug target for the control of this parasitaemia.

A giardíase é a doença gastrointestinal de maior incidência no mundo, causada pelo protozoário Giardia duodenalis, para a qual não existe vacina ou tratamento eficaz. Com o objetivo de encontrar novos alvos farmacológicos contra esse parasita, têm sido estudadas enzimas do metabolismo energético, como as sirtuínas, desacetilases dependentes do dinucleotídeo adenina nicotinamida (NAD). GdSir2.1 e GdSir2.2 foram previamente identificados como desacetilases dependentes de NAD, com diferentes localizações subcelulares. Neste trabalho, outro candidato a sirtuin (GdSir2.3) foi estudado usando ferramentas de bioinformática para a identificação de características típicas da família sirtuin na sequência do candidato; e experimentais, como a obtenção da proteína recombinante 6xHis-GdSir2.3 que demonstrou atividade desacetilase dependente de NAD; e que serviu como antígeno na produção de IgY - α - 6xHis-GdSir2.3 para a localização subcelular da proteína endógena em G. duodenalis. O exposto é consistente com outros estudos em que o GdSir2.3 é apontado como um importante regulador de encisto devido à sua expressão aumentada durante esta fase do ciclo de vida, constituindo-se como um alvo promissor para o controle dessa parasitemia.

Detección de anticuerpos tipo igg contra borrelia burgdorferi, y factores asociados a la enfermedad de lyme en población canina, de los municipios honda-Tolima, la mesa y Chia-Cundinamarca. detección de anticuerpos tipo igg contra borrelia burgdorferi en población canina / Detection of IgG-type antibodies against Borrelia Burgdorferi, and factors associated with Lyme disease in the canine population, of the municipalities Honda-Tolima, La Mesa and Chia-Cundinamarca

Borrelia burgdorferi, is the spirochete responsible for causing Lyme disease in man and different animals. Objective. Detect specific IgG type antibodies against Borrelia burgdorferi, in canines using the immunofluorescence technique and its correlation with other factors associated with Lyme disease. Methods. Blood was taken for IgG detection against Borrelia burgdorferi sl; Peripheral blood smear of the canines and hemolymph of the ticks to search for spirochetes with Wright staining and finally classification of the ticks using morphometric keys. Results. In the serological test, on average 69.0% of the canines sampled gave positive results in the different titrations. Bacterial structures were spirally visualized both in the peripheral blood of the canines and in the hemolymph of the ticks. The vector found was classified as Rhipicephalus sanguineus, until now not reported in the scientific literature as a carrier of Borrelia, nor associated with the disease.

Armonización de la determinación de ANCA por inmunofluorescencia indirecta: primera reunión argentina / Harmonization of the determination of ANCA by indirect immunofluorescence: first argentine meeting / Harmonização da determinação de ANCA por imunofluorescência indireta: primeira reunião argentina

Resumen La determinación de anticuerpos anti-citoplasma de neutrófilos (ANCA) es utilizada en la clínica diaria como una herramienta diagnóstica en distintas formas de vasculitis de pequeños vasos (vasculitis asociadas a ANCA), incluyendo la granulomatosis con poliangeítis (antes: granulomatosis de Wegener), poliangeítis microscópica y granulomatosis eosinofílica con poliangeítis (antes: síndrome de Churg-Strauss), y como apoyo diagnóstico de colitis ulcerosa, colangitis esclerosante primaria y enfermedad de Crohn. Estos anticuerpos están dirigidos contra distintos epítopos antigénicos de diferentes proteínas presentes en el citoplasma del neutrófilo. La determinación de ANCA, habitualmente realizada por la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI), presenta cierto grado de complejidad en la definición de las imágenes de los diferentes patrones, variabilidad en la forma de trabajo y expresión de resultados. El 24 de octubre de 2018 en el marco del X Congreso Argentino de la Calidad en el Laboratorio Clínico y VIII Jornadas Latinoamericanas de la Calidad en el Laboratorio Clínico, en la Ciudad de Buenos Aires, se realizó una reunión de Armonización de la Determinación de ANCA por IFI con el objeto de presentar, discutir y consensuar los distintos aspectos que se presentan en esta técnica. Las propuestas iniciales fueron discutidas arribándose a recomendaciones generales para proporcionar estándares de trabajo e interpretación de imágenes con el objeto de disminuir la variabilidad de resultados entre los laboratorios clínico-inmunológicos.

Abstract Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) tests are widely used in daily clinical practice as a useful tool for the diagnosis of pathologies such as granulomatosis with polyangiitis, microscopic polyangiitis, pauci-immune necrotizing segmental glomerulonephritis and eosinophilic granulomatosis with polyangiitis, ulcerative colitis, primary sclerosing cholangitis, Crohn's disease, etc. These antibodies are directed against different antigenic epitopes of various proteins which are present in the neutrophil cytoplasm. ANCA testing is usually carried out by using indirect immunofluorescence (IIF) method. The determination of ANCA presents some difficulties in the definition of the images of the different patterns, work protocols and result reports uniformity. The "Harmonization Conference on the Determination of ANCA by IIF" was held within the framework of the X Argentine Congress on Quality in the Clinical Laboratory and VIII Latin American Conference on Quality in the Clinical Laboratory, in Buenos Aires, Argentina, on October 24, 2018, in order to present, discuss and agree on different aspects of this method. Some initial proposals were discussed, arriving at general recommendations to provide standards of work and an image interpretation, with the aim of reducing the variability of results among the clinical-immunological laboratories.

Resumo A determinação de anticorpos anti-citoplasma de neutrófilos (ANCA) é utilizada na prática clínica diária como um suporte diagnóstico para várias patologias, como granulomatose com poliangiite, poliangiite microscópica, glomerulonefrite segmentar necrotizante pauci-imune e granulomatose eosinofílica com poliangiite, poliarterite nodosa, colite ulcerosa, colangite esclerosante primária, doença de Crohn. Esses anticorpos são dirigidos contra diferentes epítopos antigênicos de diferentes proteínas presentes no citoplasma do neutrófilo. A determinação de ANCA, normalmente realizada pela técnica de imunofluorescência indireta IFI, apresenta certo grau de complexidade na definição das imagens dos diferentes padrões, variabilidade na forma de trabalho e expressão de resultados. Em 24 de outubro de 2018, no âmbito do X Congreso Argentino de la Calidad en el Laboratorio Clínico (X Congresso Argentino da Qualidade no Laboratório Clínico) e VIII Jornadas Latinoamericanas de la Calidad en el Laboratorio Clínico (VIII Jornadas Latino-americanas da Qualidade no Laboratório), na cidade de Buenos Aires, foi realizada uma Jornada de Harmonização da Determinação de ANCA pelo IFI a fim de apresentar, discutir e concordar sobre os diferentes aspectos que são apresentados nesta técnica. As propostas iniciais foram discutidas, chegando a recomendações gerais para fornecer padrões de trabalho e interpretação de imagens visando reduzir a variabilidade de resultados entre os laboratórios clínico-imunológicos.

Virus respiratorios y características clínico-epidemiológicas en los episodios de infección respiratoria aguda / Respiratory viruses and clinical- epidemiological characteristics in episodes of acute respiratory infection

RESUMEN Con el objetivo de determinar la frecuencia viral y las características clínico-epidemiológicas en los episodios de infección respiratoria aguda de pacientes del Instituto Nacional de Salud del Niño San Borja en Lima, se analizó la información de los episodios de pacientes que requirieron al menos una prueba de inmunofluorescencia directa desde el 1 de enero del 2017 al 31 de diciembre del 2018. Se identificaron 1153 episodios en 707 pacientes. La mediana de la edad fue de 1 año y el 55% fueron del sexo masculino. La frecuencia viral fue del 13,4%; el virus respiratorio sincitial se identificó en el 10,7% de los episodios. La frecuencia viral fue mayor en los menores de 1 año (16,2%); en aquellos con enfermedad congénita respiratoria (38,9%) y durante el otoño (24,2%). Los síntomas más comunes fueron tos (70,3%) y fiebre (53,4%); y los principales diagnósticos fueron neumonía viral (31,8%) y bronquiolitis (23,4%). Se concluye que la frecuencia viral respiratoria estuvo relacionada con la edad, estacionalidad y patología preexistente.

ABSTRACT The aim of the study was to determine the viral frequency and clinical-epidemiological characteristics in the episodes of acute respiratory infection in patients of the Instituto Nacional de Salud del Niño San Borja in Lima, the information of the episodes of patients who required at least one direct Immunofluorescence test from January 1, 2017 to December 31, 2018 was analyzed. 1153 episodes were identified in 707 patients. The median age was 1 year and 55% were male. The viral frequency was 13.4%; respiratory syncytial virus was identified in 10.7% of the episodies. The viral frequency was higher in children under 1 year of age (16.2%); in those with congenital disease respiratory (38.9%) and during the autumn (24.2%). The most common symptoms were cough (70.3%) and fever (53.4%); and the main diagnoses, viral pneumonia (31.8) and bronchiolitis (23.4%). It is concluded that the respiratory viral frequency was related to age, seasonality and pre-existing pathology.

Virus respiratorios y características clínico-epidemiológicas en los episodios de infección respiratoria aguda / Respiratory viruses and clinical- epidemiological characteristics in episodes of acute respiratory infection

RESUMEN Con el objetivo de determinar la frecuencia viral y las características clínico-epidemiológicas en los episodios de infección respiratoria aguda de pacientes del Instituto Nacional de Salud del Niño San Borja en Lima, se analizó la información de los episodios de pacientes que requirieron al menos una prueba de inmunofluorescencia directa desde el 1 de enero del 2017 al 31 de diciembre del 2018. Se identificaron 1153 episodios en 707 pacientes. La mediana de la edad fue de 1 año y el 55% fueron del sexo masculino. La frecuencia viral fue del 13,4%; el virus respiratorio sincitial se identificó en el 10,7% de los episodios. La frecuencia viral fue mayor en los menores de 1 año (16,2%); en aquellos con enfermedad congénita respiratoria (38,9%) y durante el otoño (24,2%). Los síntomas más comunes fueron tos (70,3%) y fiebre (53,4%); y los principales diagnósticos fueron neumonía viral (31,8%) y bronquiolitis (23,4%). Se concluye que la frecuencia viral respiratoria estuvo relacionada con la edad, estacionalidad y patología preexistente.

ABSTRACT The aim of the study was to determine the viral frequency and clinical-epidemiological characteristics in the episodes of acute respiratory infection in patients of the Instituto Nacional de Salud del Niño San Borja in Lima, the information of the episodes of patients who required at least one direct Immunofluorescence test from January 1, 2017 to December 31, 2018 was analyzed. 1153 episodes were identified in 707 patients. The median age was 1 year and 55% were male. The viral frequency was 13.4%; respiratory syncytial virus was identified in 10.7% of the episodies. The viral frequency was higher in children under 1 year of age (16.2%); in those with congenital disease respiratory (38.9%) and during the autumn (24.2%). The most common symptoms were cough (70.3%) and fever (53.4%); and the main diagnoses, viral pneumonia (31.8) and bronchiolitis (23.4%). It is concluded that the respiratory viral frequency was related to age, seasonality and pre-existing pathology.

Determinación de anticuerpos anti-dsDNA: evaluación del desempeño de un inmunoensayo quimioluminiscente y correlación con el método de inmunofluorescencia indirecta / Detection of anti-dsDNA antibodies: evaluation of performance of a chemiluminescent immunoassay and correlation to the indirect immunofluorescence assay / Determinação de anticorpos anti-dsDNA: avaliação do desempenho de um imunoensaio quimioluminiscente e correlação com o método de imunoflourescência indireta

Resumen La determinación de anticuerpos anti-dsDNA es de utilidad para el diagnóstico y seguimiento clínico de pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) y es uno de los criterios de clasificación del SLICC-2012. El objetivo del estudio fue verificar el desempeño del inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) QUANTA Flash dsDNA y compararlo con el método en uso de inmunofluorescencia indirecta en Crithidia luciliae (CLIFT). Se analizaron con ambos métodos 195 pacientes con diagnóstico de enfermedades del tejido conectivo y solicitud de anticuerpos anti-dsDNA. Se obtuvieron 38 sueros positivos, 133 negativos y 24 (12,3%) discordantes. Entre estos resultados discordantes, hubo 17 que correspondieron a pacientes con LES y se agruparon en 16 CLIA+/CLIFT- y 1 CLIA-/CLIFT+. Se verificó el desempeño para precisión siguiendo el protocolo EP15-A2 y la linealidad. Se estudió la concordancia mediante el coeficiente Kappa y la correlación con el coeficiente Rho de Spearman. Se observó mayor sensibilidad diagnóstica para CLIA. El grado de acuerdo fue moderado y se obtuvo buena correlación entre los valores cuantitativos de CLIA y los títulos de CLIFT. De acuerdo al buen desempeño encontrado y a los resultados discordantes analizados, la mejor estrategia para la implementación de CLIA sería utilizarla en combinación con CLIFT, lo que aumentaría la sensibilidad diagnóstica sin perder especificidad.

Abstract The detection of anti-dsDNA antibodies is useful for diagnosis and clinical monitoring of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and it is part of the classification criteria according to SLICC 2012. The purpose of this study was to verify the performance of the chemiluminescent immunoassay (CLIA) QUANTA Flash dsDNA and to compare it with the method currently in use, i.e the indirect immunofluorescence in Crithidia luciliae (CLIFT). One hundred and ninety five patients, who presented connective tissue diseases and required the study of anti-dsDNA antibodies, were analyzed. Thirty eight positive serum samples were obtained, 133 were negative and 24 (12.3%) in disagreement. Within the discordant results, there were 17 that corresponded to patients with SLE and they were grouped in 16 CLIA+/CLIFT- and 1 CLIA-/CLIFT+. The accuracy performance was assessed according to the EP15-A2 protocol and linearity. Concordance and correlation were calculated with the Kappa and Spearman's Rho coefficient, respectively. Based on the good performance observed and the discordant results analyzed, the best strategy for CLIA implementation would be to combine it with CLIFT, which would increase the diagnostic sensitivity without losing specificity.

Resumo A determinação dos anticorpos anti-dsDNA é de utilidade para o diagnóstico e seguimento clinico de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) e é um dos critérios de classificação do SLICC 2012. O objetivo do estudo foi verificar o desempenho do imunoensaio quimioluminescente (CLIA) QUANTA Flash dsDNA e compará-lo com o método em uso imunofluorescência indireta em Crithidia luciliae (CLIFT). Foram analisados com os dois métodos, 195 pacientes com diagnóstico de doenças do tecido conjuntivo e solicitude de anticorpos anti-dsDNA. Os resultados foram agrupados em 38 soros positivos, 133 negativos e 24 (12,3%) discordantes. Entre esses resultados discordantes, 17 corresponderam a pacientes com LES e se agruparam em 16 CLIA+/CLIFT- e 1 CLIA-/CLIFT+. Foi verificado o desempenho para precisão seguindo o protocolo EP15-A2 e a linearidade. Foi estudada a concordância mediante o coeficiente Kappa e correlação com o coeficiente Rho de Spearman. Observou-se maior sensibilidade diagnóstica para CLIA. O grau de acordo foi moderado e boa correlação foi observada entre os valores quantitativos de CLIA e os títulos de CLIFT. Com base no bom desempenho encontrado e nos resultados discordantes analisados, a melhor estratégia para implementar o CLIA seria utilizá-lo em combinação com o CLIFT, o que aumentaria a sensibilidade do diagnóstico sem perder a especificidade.

Diferencias fenotípicas de fibroblastos gingivales en sujetos con hiperplasia gingival idiopática frente a sujetos periodontalmente sanos: estudio piloto / Phenotypic differences of gingival fibroblasts in subjects with idiopathic gingival hyperplasia versus periodontally healthy subjects: a pilot study

Objetivo: identificar, describir y diferenciar las características fenotípicas de los fibroblastos gingivales (FGs) en pacientes con hiperplasia gingival idiopática (HGI) e individuos periodontalmente sanos. Métodos: los FGs fueron aislados a partir de tejido gingival de individuos periodontalmente sanos (n=2) y pacientes con HGI (n=2). Los FGs se cultivaron en el medio DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) a 37°C con 5% de CO2. La identificación y localización de la actina, vimentina y mitocondrias en FGs fue realizada y evaluada microscópicamente mediante inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales. La capacidad de migración de los FGs en los pacientes con HGI e individuos sanos también fue estudiada. Resultados: todos los FGs fueron mononucleares, fusiformes y con prolongaciones citoplasmáticas visibles. La faloidina permitió identificar una densa red de actina en los FGs de pacientes con HGI, contrariamente a los FGs de individuos periodontalmente sanos. La vimentina y mitocondrias fueron identificadas en los FGs de individuos sanos y pacientes con HGI sin ninguna alteración en su expresión y localización. La migración de la monocapa de los FGs indicó una actividad de migración celular importante en los FGs de los pacientes con HGI, en relación a los FGs de los individuos periodontalmente sanos. Conclusión: los FGs de pacientes con HGI conservan características fenotípicas celulares similares a los FGs de individuos periodontalmente sanos. Sin embargo, los FGs de pacientes con HGI simulan tener una mayor capacidad migratoria que amerita ser explorada en futuros trabajos de investigación.

Objective: To identify and to describe the phenotypic characteristics of gingival fibroblasts from patients with idiopathic gingival hyperplasia (IGH) and periodontally healthy individuals. Methods: Gingival fibroblasts (GFs) were isolated from gingival tissue from periodontally healthy individuals (n=2) and patients with IGH (n=2). The GFs were grown in DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) at 37°C with 5% CO2. The identification and location of actin, vimentin and mitochondria in GFs were performed and evaluated microscopically by immunofluorescence with monoclonal antibodies. The migration capacity of GFs from IGH and healthy individuals was also studied. Results: All the GFs were mononuclear, fusiform and with visible cytoplasmic extensions. The phalloidin allowed to identify a dense actin network in the GFs of patients with IGH, contrary to the GFs of periodontally healthy individuals. Vimentin and mitochondria were identified in the GFs of healthy individuals and patients with IGH without any alteration in their expression and location. Monolayer migration of GFs indicates significant cell migration activity in the GFs of patients with IGH in relation to the GFs of periodontally healthy individuals. Conclusion: GFs from patients with IGH retain cellular phenotypic characteristic similar to GFs from periodontally healthy individuals. However, the GFs of patients with IGH simulate having a greater migratory capacity that deserves to be explored in future research works.

Frecuencia de patrones de anticuerpos antinucleares, en pacientes con sospecha de enfermedades sistémicas reumáticas autoinmunes / Frequency of antinuclear antibodies patterns in patients with suspected of systemic autoimmune rheumatic diseases / Frequência de Padrões de anticorpo antinucleares em pacientes com suspeita de doenças sistêmicas reumáticas autoimunes / Fréquence des profils d'anticorps antinucléaires dans les cas de suspicion de maladies rhumatismales auto-immunes systémiques

Resumen Objetivo: El objetivo de este trabajo es describir la frecuencia de los patrones de tinción de Anticuerpos antinucleares (ANA), en pacientes con sospecha de enfermedades autoinmunes, en el sureste mexicano. Materiales y métodos: Se emplearon células Hep-2 y anticuerpo anti-IgG acoplado a FITC (EuroimmunTM) para el análisis de las muestras a través de inmunofluorescencia indirecta. Resultados: Del total de los pacientes, 89 fueron mujeres (87.2%) y 13 hombres (12.7%), en edades de 2 a 88 años. Se observó que 85 muestras (70.6 %) correspondieron al patrón nuclear, 10 (9.8 %) al patrón citoplasmático y 7 (6.8 %) al patrón mitótico. De los patrones nucleares, 37 (36.8%), 17 (16.7%) y 12 (11.8%) correspondieron a patrones homogéneo, granular fino y granular grueso respectivamente. Conclusiones: En este trabajo se observó, que la mayor frecuencia de anticuerpos antinucleares se encontró en pacientes en edad productiva. Los patrones más observados fueron el homogéneo, granular fino y granular grueso. El patrón homogéneo se asocia a LES cuando se presenta en títulos altos.

Abstract Objective: The objective of this work was to describe the frequency of antinuclear antibody (ANA) staining patterns in patients with suspected autoimmune diseases in southeastern Mexico. Materials and methods: Hep2 cells and Anti-Human IgG coupled to FITC (EuroimmunTM) were used for analyzing samples through indirect immunofluorescence. Results: 87.2 % per cent (89) of the total number of patients were women and 12.7 % were men (13) aged from 2 to 88 years. It was observed that 85 samples (70.6%) corresponded to the nucleolar pattern, 10 (9.8%) to the cytoplasmic pattern and 7 (6.8%) to the mitotic pattern. Of the nuclear patterns, 37 (36.8%), 17 (16.7%) and 12 samples (11.8%) corresponded to homogeneous, nuclear fine speckled and nuclear coarse speckled patterns respectively. Conclusions: In this work, it was observed that the highest frequency of antinuclear antibodies was found in patients of productive age. The most observed patterns were the homogeneous, nuclear fine speckled and nuclear coarse speckled. The homogeneous pattern is associated with SLE when presented in high titers.

Resumo Objetivo: deste trabalho é descrever a frequência dos padrões de coloração de anticorpos antinucleares (ANA) em pacientes com suspeita de doenças autoimunes no sudeste mexicano. Materiais e métodos: células Hep-2 e anticorpo anti-IgG acoplado a FITC (EuroimmunTM) foram utilizados para a análise das amostras por imunofluorescência indireta. Resultados: Do total de pacientes, 89 eram mulheres (87,2%) e 13 homens (12,7%), com idade entre 2 e 88 anos. Observou-se que 85 amostras (70,6%) corresponderam ao padrão nuclear, 10 (9,8%) ao padrão citoplasmático e 7 (6,8%) ao padrão mitótico. Dos padrões nucleares, 37 (36,8%), 17 (16,7%) e 12 (11,8%) corresponderam aos padrões homogêneo, granular fino e granular grosso, respectivamente. Conclusões: Neste trabalho observou-se que a maior frequência de anticorpos antinucleares foi encontrada em pacientes em idade produtiva. Os padrões mais observados foram homogêneo, granular fino e granular grosso. O padrão homogêneo está associado ao LES quando ocorre em altos títulos.

Résumé Objectif : L'objectif de ce travail est de décrire la fréquence des profils de coloration des Anticorps Antinucléaires (ANA), dans les cas de suspicion de maladies auto-immunes, dans le sud-est du Mexique. Matériels et méthodes : Des cellules Hep-2 et un anticorps anti-IgG couplé au FITC (EuroimmunTM) ont été utilisés pour l'analyse desé chantillons par immunofluorescence indirecte. Résultats : Sur le total des patients, 89 étaient des femmes (87,2 %) et 13 des hommes (12,7 %), tous âgés de 2 à 88 ans. Il a été observé que 85 échantillons (70,6 %) correspondaient au patron nucléaire, 10 (9,8 %) au patron cytoplasmique et 7 (6,8 %) au patron mitotique. Parmi es patrons nucléaires, 37 (36,8%), 17 (16,7%) et 12 (11,8%) avaient respectivement un aspect homogène, moucheté à grains fins et moucheté à gros grains. Conclusions : Dans travail, il a été observé que la fréquence la plus élevée d'anticorps antinucléaires a été trouvée chez les patients en âge productif. Les aspects les plus observés ont été de type homogène, moucheté à grains fins et moucheté à gros grains. L'aspect homogène est associé à l'ELS lorsqu'il est présenté en titres élevés.

Perspectivas en investigación: células HEp-2 infectadas con EB's de Chlamydia trachomatis serovar 2 (VR-902B) / Chlamydia trachomatis: Research Perspectives. HEp-2 Cells Infected with EB's from Chlamydia trachomatis serovar 2 (VR-902B): Research Perspectives

Resumen Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) es una bacteria Gram negativa inmóvil, caracterizada por ser un microorganismo intracelular obligado y por poseer un ciclo reproductivo en el que puede distinguirse una forma infecciosa extracelular metabólicamente inerte (cuerpo elemental - EB's), y una forma no infecciosa intracelular y activa (cuerpo reticulado - RB's). C trachomatis se caracteriza por causar infección en humanos, está relacionada con enfermedades de transmisión sexual e infecciones oculares; por lo que puede conllevar a secuelas de interés, si no se da un tratamiento oportuno. El objetivo de este estudio fue optimizar el modelo de infección de C. trachomatis en células HEp-2 con cuerpos elementales (EB's) de C. trachomatis serovar L2. Inicialmente, se establecieron las condiciones para el crecimiento adecuado de las células HEp-2 en tiempo y con una confluencia del 90%, para continuar con la optimización de un protocolo de infección. La infección fue confirmada a partir de la coloración con Giemsa permitiendo evaluar características morfológicas tanto de las células HEp-2 sin infectar e infectadas, y así mismo, de los cuerpos elementales de C. trachomatis. Finalmente, se corroboró la infección con la técnica de inmunofluorescencia directa que detecta la proteína de membrana MOMP de C. trachomatis. Tras los ensayos realizados se evidenció la presencia de cuerpos elementales próximos y dentro del citoplasma celular, así como células vacuoladas y daño celular causado por la infección.

Abstract Chlamydia trachomatis (C. Trachomatis) is a Gram negative unmoving bacterium, characterized by being an obligate intracellular microorganism and having a reproductive cycle in which a metabolically inactive extracellular infectious form (elementary body - EB's) can be distinguished from an intracellular active and non-infectious form (reticulated body - RB's). C trachomatis is characterized by causing infection in humans, is related to sexually transmitted diseases and eye infections, so it can lead to sequelae of interest if timely treatment is not given. The objective of this study was to optimize the infection model of C. trachomatis in HEp-2 cells with elementary bodies (EB's) of C. trachomatis serovar L2. Initially, the conditions for the adequate growth of HEp-2 cells were established in time and with a confluence of 90%, to continue with the optimization of an infection protocol. The infection was confirmed from the staining with Giemsa allowing to evaluate morphological characteristics of both uninfected and infected HEp-2 cells and also of the elementary bodies of C. trachomatis. Finally, the infection was corroborated with the direct immunofluorescence technique, that detects the C. trachomatis MOMP membrane protein. After the tests were performed, the presence of elementary bodies nearby and within the cellular cytoplasm was evidenced, as well as vacuolated cells and cellular damage caused by the infection.

Dinámica de anticuerpos e infección activa por Anaplasma marginale en becerras / Dynamics of Anaplasma marginale Active Infection and Antibodies in Calves

Resumen Históricamente, la especie bovina ha sido de vital importancia para el hombre como animal de abasto, por lo que el cuidado y protección a esta especie es muy importante. A nivel mundial existen diversas enfermedades que atacan el ganado bovino, entre las cuales se encuentra anaplasmosis bovina. La presente investigación no experimental de campo tiene como objetivo evaluar la dinámica de anticuerpos anti-Anaplasma y determinar en qué momento el animal presenta infección activa. Para ello, se escogió una población de 35 becerras ubicadas en la unidad de producción del municipio Crespo, en el estado de Lara, Venezuela. A las becerras, de 0 a 7 días de nacidas, se le extrajo la sangre en tubos con anticoagulante, para realizar frotis de capa blanca y determinación del hematocrito, y sin anticoagulante, para la inmunofluorescencia indirecta. Posteriormente, fueron muestreadas cada 15 días hasta obtener un total de 12 muestras por cada becerra. Para analizar los datos, fue utilizada la prueba estadística X2 del programa estadístico Epi Info versión 3.5.4. Se obtuvo un 79,05 % de positividad y 100 % de seropositividad para Anaplasma marginale. Se concluyó que los altos valores obtenidos con las pruebas serológicas son indicativos de animales con memoria inmunológica, lo que quiere decir que no necesariamente estarían infectados al momento del muestreo. Asimismo, se confirma la capacidad de la especie bovina de crear un estado de premunición ante la anaplasmosis a edades tempranas y mantenerla por un periodo prolongado, de modo que se encuentra una estabilidad enzoótica en la unidad de producción.

Abstract Bovine species has been historically of high importance to the human beings as a provision animal. Therefore, it is highly important to care and protect this species. There are different diseases attacking the bovines around the world, such as the bovine anaplasmosis. This non-experimental research in the field aims to evaluate the dynamics of anti-Anaplasma antibodies and to determine when the animal has an active infection. To do so, a population of 35 female calves was used from the production unit in the town Crespo, Lara State, Venezuela. Female calves, from 0 to 7 days born, were taken blood samples in test tubes with anticoagulant. Then a white smear test was carried out and the hematocrit was determined. Samples without anticoagulant were taken to do an indirect immunofluorescence test. The calves were taken blood samples every 15 days in order to complete 12 samples from each individual calf. For the data analysis, the statistical test X2 from the software Epi Info v.3.5.4 was used. Positive tests accounted for 79.05 % of the samples and seropositiveness for Anaplasma marginale reached 100%. It is concluded that the high values resulting from the serologic tests indicate that these animals have an immune memory, which means, in turn, that they were not necessarily infected at the time of being taken the samples. Likewise, this study confirms that this species is able to create a pre-immunity condition to the anaplasmosis at an early age and to keep it for a long term. This way, they reach an enzootic balance in the production unit.

Niveles de anticuerpos anti nucleares por Fana y Ana-Lia en pacientes con enfermedades reumáticas sistémicas / Levels of anti-nuclear antibodies by Fana and Ana-Lia in systemic rheumatic diseases patients

Objetivo: Correlacionar los niveles de anticuerpos antinucleares obtenidos por las técnicas de inmunofluorescencia indirecta (FANA) e inmunoensayo lineal (ANA-LIA) en pacientes diagnosticados o con sospecha clínica de enfermedad autoinmune. Métodos: Se incluyeron 100 pacientes que dieron su consentimiento informado para participar en el estudio. Los ensayos e interpretación de los resultados de las pruebas de FANA y ANA-LIA se realizaron siguiendo las recomendaciones del fabricante. Resultados: el 97,4% de los pacientes estudiados eran de sexo femenino con edad promedio de 42 años, siendo la Artritis reumatoide, Poliartritis y Lupus Eritematoso Sistémico las enfermedades que con mayor frecuencia acompañaron la solicitud médica. Se observó que ambos métodos fueron positivos en el 21% de los casos y que el indice de correlaciòn de Kappa entre las pruebas fue moderado (k= 0,51; p< 0,05), la sensibilidad y especificidad de los métodos fue del 71,4% y 84,8% respectivamente, se observó también que para un determinado patrón fluorescente puede haber positividad de más de un antígeno de la prueba de ANA-LIA y viceversa. Conclusiones: FANA es el método de tamizaje aceptado en la práctica clínica para orientar hacia un diagnóstico clínico de enfermedad autoinmune más probable, debido a la subjetividad en la interpretación de sus resultados y necesidad de entrenamiento en la identificación de los patrones fluorescentes, se requiere del apoyo de otros métodos de laboratorio que permitan identificar con mayor precisión los antígenos reconocidos por los autoanticuerpos, ANA-LIA es una herramienta de laboratorio costo-efectiva de elevada sensibilidad y especificidad que se ajusta a este requerimiento.

Objective: To correlate levels of antinuclear antibodies obtained by indirect immunofluorescence techniques (FANA) and linear immunoassay (ANA-LIA) in patients diagnosed or with clinical suspicion of autoimmune disease. Methods: 100 patients who gave their informed consent to participate in the study were included. Assays and interpretation of results of FANA and ANA-LIA test were performed following the manufacturer's recommendations. Results: 97,4% of the patients studied were female with an average age of 42 years, being rheumatoid arthritis, polyarthritis and systemic lupus erythematosus the diseases that most frequently accompanied the medical request. It was observed that both methods were positive in 21% of the cases and that the Kappa correlation index was moderate between the tests (k = 0,51; p <0,05), the sensitivity and specificity of the methods was 71,4% and 84,8% respectively. It was also observed that for a given fluorescent pattern there may be positivity of more than one antigen of the ANA-LIA test and vice versa. Conclusions: FANA is the screening method accepted in the clinical practice to guide towards a more probable clinical diagnosis of autoimmune disease. Due to the subjectivity in the interpretation of its results and the need for training in the identification of fluorescent patterns, the support of other laboratory methods that allow the identification of antigens recognized by autoantibodies with greater precision is necessary, ANA-LIA is a cost-effective laboratory tool of high sensitivity and specificity that meets this requirement.

Inmunofluorescencia indirecta versus reacción de polimerasa en cadena para el diagnóstico de virus respiratorios en niños ingresados en un hospital de la Región Metropolitana / Indirect immunofluorescence technique versus polymerase chain reaction for the diagnosis of respiratory viruses in children admitted to a hospital in the Metropolitan Region

Resumen Introducción: La temprana detección viral en infecciones respiratorias agudas (IRA) es esencial para establecer una terapia apropiada y prevenir el contagio intrahospitalario. Objetivo: Comparar la eficacia de la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con la reacción de polimerasa en cadena (RPC) para identificar virus respiratorios en niños hospitalizados por IRA. Métodos: Se incluyeron 47 aspirados nasofaríngeos de niños ≤ 2 años con IRA. La IFI incluyó virus respiratorio sincicial (VRS), adenovirus, influenza A y B y parainfluenza. La RPC incluyó, además, la detección de metapneumovirus, enterovirus/rinovirus, bocavirus y coronavirus. Se estimó sensibilidad, especificidad, valor predictor positivo y negativo (VPP/VPN) y correlación kappa para VRS mediante IFI en comparación a la RPC. Resultados: La IFI detectó únicamente VRS (29; 61,7%). La RPC detectó diversos virus, entre ellos VRS en 26 casos (55,3%), seguido por bocavirus (29,8%), enterovirus/ rinovirus (21,3%), adenovirus (14,9%) y parainfluenza (4,3%) entre otros, con 35,5% de co-infección. La IFI presentó sensibilidad: 85,7%, especificidad: 73,6%, VPP: 82,7%, VPN: 77,7% y kappa: 0,5990 (IC 95%; 0,36360,8346) para VRS. Conclusión: La IFI presenta buena sensibilidad, pero moderada especificidad para VRS. Sin embargo, falla en la detección de otros virus respiratorios. La introducción de RPC permitiría mejorar el diagnóstico etiológico de las IRA de origen viral.

Background: Early viral detection in acute respiratory infections (ARI) is essential to establish appropriate therapy and prevent nosocomial transmission. Objective: To compare the efficacy of indirect immunofluorescence technique (IIF) with the polymerase chain reaction (PCR) to identify respiratory viruses in children hospitalized for ARI. Methods: 47 nasopharyngeal aspirates of children ≤ 2 years with ARI were included. IFI included respiratory syncytial virus (RSV), adenovirus, influenza A and B and parainfluenza. PCR also included the detection of metapneumovirus, enterovirus/rhinovirus, bocavirus and coronavirus. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive value (VPP/NPV) and kappa correlation for RSV were estimated by IIF compared to PCR. Results: The IIF detected only RSV (29; 61.7%). PCR detected several viruses, including RSV in 26 cases (55.3%), followed by bocavirus (29.8%), rhinovirus/enterovirus (21.3%), adenovirus (14.9%) and parainfluenza (4,3%) among others, with 35.5% of coinfection. The IIF presented sensitivity: 85.7%, specificity: 73.6%, PPV: 82.7%, NPV: 77.7% and kappa: 0.5990 (95% CI, 0.3636-0.8346) for RSV. Conclusion: The IIF presents good sensitivity, but moderate specificity for RSV. However, IIF fails to detect other respiratory viruses. The introduction of PCR would improve the etiological diagnosis of ARI of viral origin.

Concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa / Troponin I blood concentration in pregnant patients without and with severe preeclampsia

Resumen OBJETIVO: Comparar la concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio prospectivo y transversal efectuado en pacientes de una unidad médica de alta especialidad en Ginecología y Obstetricia de la Ciudad de México admitidas entre los meses de enero a mayo de 2019. Criterio de inclusión: pacientes de cualquier edad y paridad con más de 20 semanas de embarazo. Criterio de exclusión: mujeres con enfermedades previas que pudieran condicionar daño miocárdico. Para cuantificar la troponina I a todas se les tomó sangre venosa. El valor normal de la troponina I está entre 0 y 0.4 ng/mL. Se les tomó un electrocardiograma y una radiografía de tórax. Los reportes de ambos grupos se compararon. Se utilizó estadística descriptiva y prueba t de Student pareada. RESULTADOS: 71 mujeres reunieron los criterios de inclusión y se dividieron en dos grupos: 37 pacientes sin preeclampsia (grupo A) y 34 con preeclampsia (grupo B). La concentración sanguínea de la troponina I del grupo A fue 0.05 ± 0.008 ng/mL y del grupo B: 0.05 ± 0.02 ng/mL (p = 0.30). En el grupo B se encontraron alteraciones electrocardiográficas en 14.7% (n = 5) cuyos valores de troponina I fueron normales. La radiografía del tórax fue normal en 100%. CONCLUSIONES: La concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa resultó normal, incluidas las 5 mujeres con preeclampsia y alteraciones electrocardiográficas.

Abstract OBJECTIVE: To compare the blood concentration of Troponin I (TI) in pregnant patients without and with severe preeclampsia (SP). MATERIALS AND METHODS: Prospective, cross-sectional study, conducted in patients of a medical unit of high specialty of gynecology and obstetrics of Mexico City admitted in the period from January to May of the year 2019. Patients of any age and parity with pregnancy > 20 weeks were selected. Those with previous diseases that may condition myocardial damage were excluded. Venous blood was taken to quantify TI using the "Triage Cardiac Panel"® device of the Biosite® brand that runs an indirect immunofluorescence program coupled to a reader called "Triage Meter"®. For this test the normal value of TI is 0 to 0.4 ng/mL. An electrocardiogram and a chest X-ray were also performed. The results of both groups were compared. Descriptive statistics and the paired Student's T test were used. RESULTS: 71 women met the selection criteria. Two groups were formed: 37 patients without preeclampsia (group A) and 34 women with PS (group B). The blood concentration of TI in group A was 0.05 ± 0.008 ng / ml and in group B 0.05 ± 0.02 ng/mL (p = 0.30). In group B electrocardiographic abnormalities were found in 14.70% (5 cases) whose TI values were normal. Chest x-ray was normal in 100%. CONCLUSIONS: the blood concentration of TI in pregnant patients without and with PS was normal, including 5 preeclamptic women with electrocardiographic abnormalities.

Bartonella henselae: evidencia serológica en pacientes pediátricos con sospecha clínica de enfermedad por arañazo de gato / Bartonella henselae: Serological evidence in pediatric patients with clinical suspicion of cat scratch disease

La enfermedad por arañazo de gato (EAG) es producida por Bartonella henselae.Afecta principalmente a ninos y el reservorio es el gato doméstico. El diagnóstico de laboratorio se basa en la detección de anticuerpos por inmunofluorescencia indirecta (IFI). El objetivo de este trabajo fue analizar la evidencia serológica de infección por B. henselae en pacientes pediátricos que reunían criterios clínicos/epidemiológicos para la sospecha de EAG. Se estudió a 92 pacientes; de acuerdo con los resultados serológicos, estos fueron categorizados en 4 grupos: 1) IgG (+)/IgM (+), 31,5% (n = 29);2) IgG (-)/IgM (+), 10,9% (n = 10);3) IgG (+)/IgM (-), 9,8% (n = 9), y 4) IgG (-)/IgM (-), 47,8% (n = 44). La divulgación de estos resultados intenta promover futuros trabajos que investiguen la seroprevalencia de Bartonella spp. en Argentina. Esto permitirá conocer la importancia de esta zoonosis en nuestra población y evaluar nuevos puntos de corte para esta técnica serológica.

Cat scratch disease (CSD) is caused by Bartonella henselae, which mainly affects children. The cat is the reservoir. The laboratory diagnosis is based on the detection of antibodies by the Indirect Immunofluorescence (IFI) assay. The objective of this study was to analyze the serological evidence of B. henselae infection in pediatric patients that met the clini-cal/epidemiological criteria for suspected CSD. We studied 92 patients, who were categorized into four serological groups: 1) IgG (+)/IgM(+), 31,5% (n = 29); 2) IgG (-)/IgM(+), 10,9% (n = 10); 3) IgG (+)/IgM(-), 9,8% (n = 9); 4) IgG (-)/IgM(-), 47,8% (n = 44). These findings aim to promote future works for investigating the seroprevalence of Bartonella spp. in Argentina, which will allow us to know the importance of this zoonosis in our population and to evaluate new cut-off points of the technique.

Interpretación de los autoanticuerpos en enfermedades reumatológicas / Interpretation of autoantibodies in rheumatological diseases

RESUMEN Las enfermedades autoinmunes son un grupo de patologías crónicas en las que factores genéticos, ambientales y hormonales contribuyen a su aparición. Además de tener un amplio espectro clínico, la interpretación de los diversos autoanticuerpos y técnicas utilizadas en el laboratorio también son un reto clínico. Dada la complejidad de estas enfermedades, es muy importante apoyarse en las pruebas de laboratorio para establecer un correcto diagnóstico, seguimiento y, en algunos casos inclusive, establecer pronósticos o predicción de la posible aparición de autoinmunidad. Con todo esto se pretende mejorar la calidad de vida de los pacientes disminuyendo la gran morbimortalidad de este grupo de enfermedades, especialmente al diagnosticarlas en etapas tempranas. La mayoría de las enfermedades reumatológicas se caracterizan por la alta producción de autoanticuerpos y reactantes de fase aguda, los cuales están implicados en su fisiopatología produciendo daño directo a nivel sistémico. Entre estas, el lupus eritematoso sistémico, la artritis reumatoide y el síndrome de Sjögren son las más reconocidas. Portales motivos, el objetivo de este trabajo es hacer una revisión que permita guiar tanto a médicos como a personal de laboratorio en la interpretación de los diferentes autoanticuerpos en enfermedades autoinmunes.

ABSTRACT Autoimmune diseases are a group of chronic diseases in which genetic, environmental, and hormonal factors contribute to their appearance. In addition to having a broad clinical spectrum, the interpretation of the various autoantibodies and techniques used in the laboratory is also a clinical challenge. Given the complexity of these diseases, it is very important to rely on the results of laboratory tests to establish a correct diagnosis and follow-up and, in some cases even to establish a prognosis or prediction of autoimmunity. Taking all this into account, it is intended to improve the quality of life of patients by decreasing the increased morbidity and mortality in this group of diseases, especially by early diagnosis. Most rheumatological diseases are characterised by the high production of auto-antibodies and acute phase reactants, which are involved in their pathophysiology, leading to systemic involvement. Among these, the most recognised are, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and Sjögren's syndrome. For these reasons, the objective of this project is to present a review that will help both physicians and laboratory personnel in the interpretation of the different autoantibodies in autoimmune diseases.

Anticuerpos anti-DFS70: un nuevo autoanticuerpo útil en la exclusión de patologías autoinmunes / Anti-DFS70 antibodies: A new useful antibody in the exclusion of auto-immune diseases

RESUMEN Los anticuerpos anti-DFS70 (Dense Fine Speckle, peso molecular de 70 kd) son un subgrupo de anticuerpos antinucleares (ANA) de tipo natural, los cuales se manifiestan por un patrón moteado denso fino (DFS) por inmunofluorescencia indirecta. Este se caracteriza por la fluorescencia granular distribuida irregularmente en la interface de los núcleos y de la cromatina. Inicialmente, este anticuerpo fue descrito en pacientes con cistitis intersticial, dermatitis atópica y algunas neoplasias como el cáncer de próstata. Se ha encontrado que sus antígenos actúan directamente contra co-activadores de la transcripción nuclear (LEDGF/p75), codificada por el gen PSP1 y localizado en la región C terminal entre los a.a. 349 y 435. Adicionalmente, se documenta asociación con algunas funciones fisiológicas como la protección contra la apoptosis inducida por estrés, promover la supervivencia de las células epiteliales del cristalino y actuar como cofactor de replicación del virus VIH a través de su interacción con la integrasa viral. En el campo de la autoinmunidad se ha evidenciado recientemente la importancia de este anticuerpo como marcador biológico útil en la discriminación de personas con ANA positivos que no evolucionan a enfermedad autoinmune sistémica (EAI). Lo anterior se ha basado en la observación de que estos anticuerpos son más frecuentes en individuos sanos que en los pacientes con EAI y que los individuos sanos con anti-DFS70 positivo no desarrollaron EAI después de un seguimiento clínico por 4 arios o más. Este artículo revisa la descripción de los anti-DFS70 y su utilidad en la práctica clínica.

ABSTRACT Anti-DFS70 antibodies (Dense Fine Speckled, 70 kd molecular weight) are a sub-group of anti-nuclear antibodies (ANA) that show a fine dense speckled pattern (DFS) by indirect immunofluorescence. This pattern is also recognized by irregularly distributed granular fluorescence at the interface of nuclei and chromatin. This antibody was initially described in patients with interstitial cystitis, atopic dermatitis, and malignancy, such as prostate cancer. These antigens have been found to act directly against co-activators of nuclear transcription (LEDGF/p75) encoded by the PSP1 gene and located in the C-terminal region between the a.a. 349 and 435. Additionally, associations with some physiological functions have been described, such as protection against stress-induced apoptosis, the survival of lens epithelial cells, and acting as a cofactor of HIV replication through its interaction with viral integrase. As regards autoimmunity, recent evidence has also shown the importance of this antibody as a useful biological marker in the discrimination of individuals with positive ANA that do not progress to systemic autoimmune disease (SID). This is based on the observation that these antibodies are more common in healthy individuals than in patients with SID, and that healthy individuals with positive anti-DFS70 did not develop SIDs after a clinical follow-up of four years or more. This article reviews the description of anti-DFS70 and its usefulness in clinical practice.

Evaluación de la actividad inmunomoduladora de extractos metanólicos y de alcaloides de Berberis darwinii H. (Berberidaceae) / Evaluation of the immunomodulatory activity of methanolic extracts and alkaloids of Berberis darwinii H. (Berberidaceae)

Berberis darwinii Hook es una especie que habita el sur de Chile y la Patagonia, utilizada por la etnia mapuche para el tratamiento de procesos inflamatorios, estados febriles y dolor de estomacal. El propósito del siguiente estudio fue evaluar in vitro las propiedades del extracto total y de alcaloides de raíz de B. darwinii sobre viabilidad celular y la translocación del factor nuclear NF-kB en línea celular RAW 264.7. Se observó que los extractos no afectan negativamente la viabilidad en las células e inhibieron la translocación del factor nuclear NF-kB asociado a la modulación de la inflamación solo frente al extracto total. Estos resultados indicarían que B. darwinii podría inhibir algunos mecanismos específicos de la defensa celular al modular la translocación de NF- kB.

Berberis darwinii Hook is a species that inhabits southern Chile and Patagonia, used by the Mapuche ethnic group for the treatment of inflammatory processes, febrile states and stomach pain. The purpose of the following study was to evaluate in vitro the properties of the total extract and alkaloids of the root of B. darwinii on cell viability and the translocation of the nuclear factor NF-kB in cell line RAW 264.7. It was observed that the extracts did not negatively affect the viability in the cells and inhibited the translocation of the nuclear factor NF-kB associated with the modulation of inflammation only against the total extract. These results indicate that B. darwinii could inhibit some specific mechanisms of cell defense by modulating the translocation of NF-kB.